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Item 987654321/2655
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題名:
海洋天然物對癌細胞毒殺作用之探討
作者:
施慧娟
;
黃瑞齡
;
李昭憲
;
劉至一
;
郭家绮
;
沈國屏
日期:
2014
上傳時間:
2014-12-26T01:32:43Z (UTC)
摘要:
以前,我們的研究結果顯示,海洋天然萃取物furanoterpenoid,10-acetylirciformonin B,可抑制白血病,肝細胞瘤和結腸癌細胞的增殖,具有DNA 損傷和細胞凋亡的白血病HL60 細胞的誘導劑。在這項研究中,我們擴展了這些結果,並進一步探索參與細胞凋亡誘導這種海洋天然產物的精確機制。在目前的實驗中,我們的意圖是不同的,由於10AB 治療HL60 細胞,利用DAPI 方法染色核細胞凋亡。以前的研究表明,10AB 的DNA 破壞作用是誘導H2AX 的磷酸化(γH2AX)和尾部運動的彗星試驗的增長,這表明增加的雙鏈DNA 斷裂(DNA 雙鏈斷裂)。我們將應用膜聯蛋白V 和PI 染色細胞流式細胞儀分析,以評估凋亡率。此外,我們測試的Z-VAD-FMK,泛半胱天冬酶抑製劑的影響,以減少γH2AX被誘導10AB。另一方面,我們進行的MTT 增殖測定來檢查10AB 對鼠肺泡巨噬細胞NR8383 細胞和白血病HL60 細胞的生存力的影響。 利用10AB 檢測超螺旋PHOT,纖維蛋白溶酶DNA 的放鬆和免疫印跡分析陣列,以評估凋亡標記。我們預測10AB 可能誘導細胞凋亡,和10AB 的凋亡作用可能是通過半胱天冬途徑在癌細胞中部分地介導的。在目前的研究中,我們進一步研究胱天蛋白酶Caspase 和細胞凋亡作用誘發10AB 之間的關係。半胱氨酸蛋白酶3 和9 的激活與泛蛋白酶抑製劑,Z-VAD-FMK 的預處理顯著減少,可由西方墨點法來證實。此外,預處理泛蛋白酶抑製劑略有減少γH2AX 誘導10AB。這些實驗結果顯示,10AB 的凋亡作用被部分通過蛋白酶介導的途徑。今後,我們將繼續調查海綿萃取物furanoterpenoid 抗癌機制。
關聯:
美和學校財團法人美和科技大學103年度教師產學合作計畫結案報告書
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[護理系] 研究計畫
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施慧娟103年度產學合作計畫結案報告書 (3[1].pdf
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