利用蛋白質體學研究荖葉萃取物borny cis-4-hydroxycinnamate 對黑色素癌細胞產生細胞凋亡之分子機制

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Title:	利用蛋白質體學研究荖葉萃取物borny cis-4-hydroxycinnamate 對黑色素癌細胞產生細胞凋亡之分子機制
Authors:	楊子妍;鄭宇涵;陳貫哲;侯羿任;吳美莉;吳裕仁
Keywords:	人類黑色素癌細胞;荖葉;borny cis-4-hydroxycinnamate;蛋白質體學;膜電位;內質網壓力
Date:	2015
Issue Date:	2015-11-19
Abstract:	基底細胞癌(basal cell carcinoma)、鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma)、黑色素細胞癌（melanoma）是最常見的三種皮膚癌種類，其中黑色素細胞癌是屬於高度轉移性的惡性腫瘤類型，除了容易轉移至他處的皮膚、皮下組織及淋巴之外，也容易轉移至其他器官。目前治療皮膚癌的方法大多仰賴手術切除、化學治療、放射治療、標靶藥物治療等方法。荖葉(Piper betle) 是胡椒科植物含有簍葉酚、烯丙基焦性兒茶酚以及多種氨基酸等成分，在台灣一年四季皆可採收，有文獻指出荖葉具有抗氧化、降血壓、驅蟲、抗菌、作為抗抑鬱藥物的能力。本實驗中利用荖葉之萃取化合物 borny cis-4-hydroxycinnamate與人類黑色素癌A375細胞與A2058 細胞進行實驗，經由TUNEL 及Annexin V staining 初步發現borny cis-4-hydroxycinnamate 對於A375 與A2058 細胞皆有抑制增生的效果，因此更進一步透過蛋白質體學 (proteomics) 的研究方法來觀察borny cis-4-hydroxycinnamate 對黑色素細胞內總體蛋白質之變化並鑑定其身分，並且由鑑定出之蛋白質身分發現其與內質網及粒線體功能有相關聯性。利用 TUNEL/DAPI 螢光染色、流式細胞儀分析、JC-1 螢光染色等研究，發現borny cis-4-hydroxycinnamate 會促使 A375 與A2058 細胞產生細胞凋亡現象，並且也會造成粒線體膜電位失衡，導致Cytochrome C 被釋出至細胞質中進而活化 Caspase-3,-9 導致細胞凋亡，同時產生內質網壓力(ER-stress)形成未折疊蛋白反應 (unfolded protein response,UPR)的發生，並經由PERK/ATF6/IRE1 pathway 下游蛋白的活化，促使細胞邁向凋亡的結果，推測borny cis-4-hydroxycinnamate 可能會使 A375 與 A2058 細胞經由粒線體失活、內質網壓力產生及活化caspase cascade 訊息途徑，導致造成細胞凋亡的結果。
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